科锐诺生物(查看)-外泌体粒径检测-武汉科锐诺生物科技有限公司

科锐诺生物(查看)-外泌体粒径检测

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在透射电镜基础上，用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记，利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点，同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得经典形态的外泌体，又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。

iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素试剂来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一iTRAQ试剂，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。

外泌体与微泡：我们知道，细胞间相互作用可以通过释放蛋白质、核酸、脂质等分子到胞外与受体结合从而介导胞内细胞传导。

除此之外，细胞还可以释放膜囊泡，外泌体与微泡就是其中两种，二者相似但形成方式不同：外泌体是细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中的膜囊泡，而微泡则是细胞出芽与细胞膜融合后直接脱落形成的囊泡，且外泌体大小均一，直径在40~100 nm，其大小取决于其起源部位以及细胞中的脂质双层结构；而微泡大小不一，直径在50 ~1000 nm之间。

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